一种人参多糖提取工艺

摘要

本发明涉及一种人参多糖的提取工艺。该方法选取生晒参，经粉碎、醇提、水提、醇沉后，离心取沉淀得粗糖提取物，再经水溶醇沉、离心取沉淀得精制糖提取物；经添加淀粉酶去淀粉，加活性炭脱色，取上清液Sevage法脱蛋白得到棕褐色粉末；再将此棕褐色粉末经柱层脱色分离，采用不同浓度的洗脱液梯度洗脱，将洗脱液浓缩，醇沉，过夜，离心，取沉淀干燥，得到人参多糖。本生产工艺具有技术可靠、操作步骤简单、条件易于控制的特点，适用于大规模生产。所制得的人参多糖纯度可达96.5％以上，纯度高、安全性好，可用于制备静脉注射人参多糖注射剂。

主权项

一种人参多糖的制备方法，其特征在于采用以下方式制备：(1)粉碎：选取生晒参，过10～100目筛；(2)醇提：使用10～100％的乙醇回流反应3～10小时，乙醇与生晒参粉末的重量比为1∶2～11，过滤，将固体产物自然风干；(3)水提：向上述风干的固体产物中加入其固体产物2～8倍体积的水，于60～110℃回流反应1～5小时得水提物；(4)醇沉：将上述水提物于35～90℃减压浓缩成密度为1.02～1.1的液体，用40～100％的乙醇室温放置10～48小时，离心，沉淀，得粗糖提取物，粗糖提取物经水溶后再加入80～100％的乙醇放置10～48小时，离心，取沉淀，得精制糖提取物；(5)酶解、脱色及除蛋白：取上述精制糖提取物按比例添加淀粉酶，置于85～95℃保温20～40分钟；按精制糖重量10～20％添加活性炭，于90～110℃回流30～45分钟脱色、离心；取上清液Sevage法脱蛋白，重复3～5次(6)取水层浓缩、离心、干燥，得到棕褐色粉末；(7)柱层脱色分离：采用葡聚糖凝胶树脂、交联琼脂糖凝胶、快流速琼脂糖凝胶中的一种为载体，将上述棕褐色粉末和载体按重量比1∶10～100上样，采用不同浓度的洗脱液梯度洗脱，将洗脱液浓缩，醇沉，过夜，离心，取沉淀干燥，得到人参多糖；所述步骤(5)中的淀粉酶为α‑淀粉酶，添加的比例为每克精制糖提取物添加1～1.2μl淀粉酶；所述步骤(7)中采用的洗脱液为Tris缓冲液，醋酸溶液，醋酸铵溶液，磷酸盐缓冲液，氯化钠溶液其中的一种，其中Tris缓冲液作为洗脱液的浓度分别为0.002mol/L，0.01mol/L，0.1mol/L；醋酸溶液作为洗脱液的浓度分别为0.01mol/L，0.1mol/L，0.8mol/L；醋酸铵溶液作为洗脱液的浓度分别为0.01mol/L，0.2mol/L，0.5mol/L；磷酸盐缓冲液作为洗脱液的浓度分别为0.002mol/L，0.02mol/L，0.1mol/L；氯化钠溶液作为洗脱液的浓度分别为0.02mol/L，0.1mol/L，0.5mol/L；所述步骤(7)中采用的葡聚糖凝胶树脂载体为DEAE‑52、Sephadex G‑25、Sephadex G‑75、Sephadex G‑100中的一种，交联琼脂糖凝胶载体为Sepharose CL‑4B、Sepharose CL‑6B中的一种，快流速琼脂糖凝胶载体为Sepharose 4FF、Sepharose 6FF、Q‑Sepharose FF的一种。