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一种大白菜真叶离体再生培养方法，其特征在于，按照下列步骤进行：1）挑选籽粒饱满的大白菜种子，在无菌条件下，先用体积百分比为70%的酒精表面杀菌0.5min～1min，再用质量浓度为3%的NaClO溶液灭菌13～15min，然后用无菌水反复冲洗4～5次，每次5 min；最后将种子播种于常规的1/2MS基本培养基的表面，在温度为25±1℃，光照时间16h/d，光照强度2000lx的条件下培养；2）当培养9～10d，幼苗生长直立后，选择生长健壮且第一片真叶完全展开，第二片真叶刚露出的植株，在其真叶柄基部和下胚轴交接处即生长点处横切，使切口处靠近生长点，但不保留生长点，并保持切口平滑，选择第一片真叶为外植体；3）将该真叶以真叶柄的下端竖直向下插入装有1号培养基的培养瓶中，并使真叶柄的下端与瓶底保持0.15cm的距离，且勿使外植体与1号培养基相接触，以免外植体玻璃化，在温度25℃±1℃，光照时间16h/d，光照强度2000lx的条件下培养9d～17d，当外植体的不定芽长在0.8cm～１.5mm时，将外植体取出，在距原切口处0.8cm处切下，保留再生芽和部分外植体，随后将其再生芽朝上，外植体切开部分向下再竖直插入装有1号培养基的培养瓶中，在温度25℃±1℃，光照时间16h/d，光照强度2000lx的条件下复壮培养10d～12d，再生芽生出丛生芽；4）将丛生芽的各个芽点切开，转入装有2号培养基培养瓶中生根，待幼苗基部形成大量的毛根后，炼苗5d～6d，取出幼苗植株，洗净根部的2号培养基，移栽到装有体积比为珍珠岩∶草炭为1∶3混合基质营养钵中，用塑料薄膜保湿7d，然后逐渐揭去塑料薄膜，10d～15d即可入土栽培。 |
