一种改良水稻籽粒氨基酸品质的方法

摘要

本发明公开了一种改良水稻籽粒氨基酸品质的方法，步骤是：A、把从蜘蛛中分离的一段拖丝蛋白基因的cDNA片段与谷蛋白启动子融合，构建重组载体；B、利用根癌农杆菌介导的转基因方法将重组载体导入水稻中，获得转化植株；C、利用聚合酶链式反应（PCR）对T0代转基因植株进行阳性检测，收获阳性单株自交种子；D、将选留的T0代阳性单株的种子种成家系（T1），对T1代单株进行阳性检测；E、继续种植T1代阳性单株种子成T2代家系，从中选择氨基酸品质提高的纯合单株，自交留种；F、对选留的纯合单株进一步进行表型选择，培育新材料。方法易行，操作简便，在水稻籽粒中表达来自蜘蛛拖丝蛋白基因的cDNA片段提高水稻籽粒氨基酸含量，提高了籽粒营养品质；提高水稻籽粒品质，效率高；应用于作物品质的改良。

主权项

一种改良水稻籽粒氨基酸品质的方法，其步骤是：A、从蜘蛛中分离的一段拖丝蛋白基因的cDNA片段，该cDNA片段由905个碱基组成，编码264个氨基酸，富含甘氨酸和丙氨酸，将它与水稻籽粒专一性谷蛋白GluB‑1启动子酶切连接连到表达载体pCAMBIA1300上，构建重组载体；B、利用根癌农杆菌介导的转基因方法将重组载体导入水稻中，获得转基因植株；C、利用聚合酶链式反应对T0代转基因植株进行阳性检测，通过Northern杂交检测阳性转基因植株转入片段的表达，通过Southern杂交鉴定阳性转基因植株的整合拷贝数，选择含单拷贝的转入片段且正常结实的转基因植株，收获单株自交种子；D、将步骤（C）选留的转基因植株的种子种成家系T1代，继续利用聚合酶链式反应PCR对T1代单株进行阳性检测，利用Northern杂交检测阳性单株转入片段的表达，结合田间表型选择转入片段表达的转基因植株，自交留种；E、继续种植步骤（D）中选留的目标单株成T2代家系，利用聚合酶链式反应PCR对T2代单株进行阳性检测，对阳性单株进行农艺性状考察和籽粒氨基酸分析，从中选择表型稳定，氨基酸品质和农艺性状有较大改善的纯合单株，自交留种；F、对选留的纯合单株进一步进行表型选择，培育新材料。