灯盏花提取物中灯盏花乙素的吸附树脂法分离工艺

摘要

本发明公开了一种灯盏花提取物中灯盏花乙素的吸附树脂法分离工艺。基于结构极为相近的灯盏花乙素和灯盏花甲素形成分子间氢键能力的不同，在大孔吸附树脂骨架上引入能形成氢键的酰胺功能基，通过疏水和氢键的协同作用，高选择性吸附灯盏花乙素，以市售提取物为原料，通过“吸附-解吸”一步连续工艺，制备灯盏花乙素含量高于98％、灯盏花甲素含量低于0.5％的样品。本发明避免使用有毒、低沸点的有机溶剂，且无需其他纯化方法的辅助，因此操作简单、环境友好，同时树脂可再生使用，生产成本大大降低，适于大规模工业化生产。所得样品可满足进一步提高灯盏花素制剂的质量标准、减小临床副反应等要求，有很好的应用前景。

主权项

一种灯盏花提取物中灯盏花乙素的吸附树脂法分离工艺，其特征在于，该工艺步骤如下：第1、将具有酰胺功能基的聚苯乙烯‑聚丙烯酸酯‑聚丙烯酰胺三元共聚物骨架的大孔吸附树脂装入玻璃交换柱中，用去离子水清洗树脂柱，待用；第2、将市售的灯盏花提取物溶解在去离子水中，配成质量体积浓度为0.3～1.0mg/mL的灯盏花提取物溶液，调节溶液pH为7.0～8.5，即为上柱液；第3、室温下，将1～8BV的上柱液以0.5～2.5BV/小时的流速通过树脂柱吸附，同时接收从树脂柱上流出的流出液，吸附完成后，用2～6BV水清洗树脂床层，同时接收此部分水溶液，与上述流出液合并，旋转蒸发，浓缩，干燥，即得所需样品；经HPLC检测，灯盏花乙素质量含量高于98％，灯盏花甲素质量含量低于0.5％；其中，第1步所述的具有酰胺功能基的聚苯乙烯‑聚丙烯酸酯‑聚丙烯酰胺三元共聚物骨架的大孔吸附树脂经过如下步骤制成：第1.1、将聚乙烯醇和氯化钠溶于水中配成水溶液作为悬浮聚合的水相，保持聚乙烯醇的质量浓度为0.5％～5％，氯化钠的质量浓度为3％～5％，并将水相加热至30～50℃；第1.2、将质量分数为30％～50％的丙烯酸甲酯、15％～25％的苯乙烯及余量为二乙烯苯配成反应的单体，同时加入单体质量的100％～150％的混合溶剂作为致孔剂，混合溶剂的组成为甲苯∶长链烷烃质量比为1∶1～2∶1，加入单体质量的1～3％的偶氮二异丁腈或过氧化苯甲酰作为引发剂，混合均匀后，成为反应的油相，其中，所述的长链烷烃为正庚烷、液蜡或200#汽油；第1.3、将上述第1.2步中的油相加入到第1.1步的水相中，其中水相与油相的体积比为3∶1～4∶1；开动搅拌，同时将反应体系升温至65～80℃，反应4～6小时，再继续升温至80～90℃，反应3‑5小时，停止反应，过滤、洗涤、干燥，即得初始吸附树脂；第1.4、加入上述第1.3步得到的树脂质量的200％～500％的溶剂将其充分溶胀后，再加入第1.3步得到的树脂质量的30％～50％的含伯胺基的有机试剂H2N‑(CH2)2‑R，R为氢、胺基或酰胺基，混合均匀后，升温至90～120℃，充分反应8～15小时，停止反应，过滤、洗涤即得具有酰胺功能基的聚苯乙烯‑聚丙烯酸酯‑聚丙烯酰胺三元共聚物骨架的大孔吸附树脂，简称为酰胺树脂，其中所述的溶剂为N，N‑二甲基甲酰胺、二乙苯或苯乙酮。