一种蒲黄药材的提取分离方法

摘要

本发明公开了蒲黄标准化提取分离方法，采用该方法可较大程度地将中药材中化学成分提取出来并进一步分离获得蒲黄中不同极性的化学组分；具体的说就是将蒲黄药材按极性分成若干化学组分，每个组分中仅包含几个主要化合物，由这些药材组分构成一个药材组分库。对药材组分库能够进行药物筛选，从而发现新药。该标准化提取分离方法不需要对每个药材都建立一套提取分离方法，大大缩短了药材提取分离的周期，同时也减少人力物力的消耗；该方法简便、推广性好，适用大部分药材。

主权项

一种蒲黄提取、分离的方法，包括如下步骤：(1)提取工艺：称取蒲黄药材，将其粉碎后过筛，然后加入8倍量体积比为1∶1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.1；在药渣中加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.2；在药渣中最后加入水，加热回流1小时，提取2次，合并滤液得提取液fr.3；(2)分离工艺：将提取液fr.1浓缩成浸膏，用硅胶拌样，采用正相硅胶柱对其进行分离，首先用体积比为50∶1的石油醚和乙酸乙酯作为流动相，得洗脱液fr.4，然后改换体积比为10∶1的氯仿和甲醇作为流动相，得洗脱液fr.5，最后用甲醇作为流动相，得洗脱液fr.6；将提取液fr.2浓缩成浸膏，用5％甲醇溶解上样，采用ODS‑C18柱对其进行分离，首先用5％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.7，然后改换70％甲醇作为流动相，得洗脱液fr.8，最后用100％甲醇溶液作为流动相，得洗脱液fr.9；(3)制备分离工艺：用制备液相色谱继续分离fr.5和fr.8；fr.5分离条件：色谱柱为Agilent，制备柱Zorbax SB‑C18；21.2mm×250mm；采用梯度洗脱，流动相A为水和B为乙腈，流速为10ml/min，柱温为室温，洗脱梯度如下：0min时，流动相A为95％的水溶液、流动相B为5％的乙腈溶液；45min时，流动相A为5％的水溶液、流动相B为95％的乙腈溶液；55min时，流动相A为5％的水溶液、流动相B为95％的乙腈溶液；fr.5分离结果：由制备液相色谱分离得到的组分及相应的收集时间如下：组分fr.51，收集时间3.0‑7.6min；组分fr.52，收集时间7.6‑12.7min；组分fr.53，收集时间12.7‑17.0min；组分fr.54，收集时间17.0‑24.1min；组分fr.55，收集时间24.1‑29.0min；组分fr.56，收集时间29.0‑34.1min；组分fr.57，收集时间34.1‑43.3min；组分fr.58，收集时间43.3‑55.0min；fr.8分离条件：色谱柱为Agilent制备柱Zorbax SB‑C18；21.2mm×250mm；采用梯度洗脱，流动相A为水和B为乙腈，流速为10ml/min，柱温为室温，洗脱梯度如下：0min时，流动相A为90％的水溶液、流动相B为10％的乙腈溶液；30min时，流动相A为75％的水溶液、流动相B为25％的乙腈溶液；45min时，流动相A为5％的水溶液、流动相B为95％的乙腈溶液；fr.8分离结果：由制备液相色谱分离得到的组分及相应的收集时间如下：组分fr.81，3.0‑8.0min；组分fr.82，8.0‑11.0min；组分fr.83，11.0‑16.4min；组分fr.84，16.4‑26.0min；组分fr.85，26.0‑30.2min；组分fr.86，30.2‑36.5min；组分fr.87，36.5‑45.0min。