发明名称 沿阶草胚状体诱导及培养方法
摘要 本发明涉及一种沿阶草胚状体诱导及培养方法,包括以下步骤:采用沿阶草的芽基部作外植体在无菌苗培养基上培养无菌苗;将无菌苗转接到初生胚状体培养基上诱导胚性愈伤组织,将胚性愈伤组织继代培养,分化形成初生胚状体;将初生胚状体转接到次生胚状体培养基上诱导次生胚状体;将次生胚状体转接至成苗培养基上产生完整植株。本发明在沿阶草初生胚状体形成后对其在形成完整植株和次生胚两个方向上进行调控,不仅可在短时间内获得完整植株,而且通过对次生胚诱导和分化的调控(诱导率达到100%),成苗率提高至95%,步骤简洁,培养成本低,繁殖率高。
申请公布号 CN101422136B 申请公布日期 2011.07.27
申请号 CN200810244728.3 申请日期 2008.12.10
申请人 江苏农林职业技术学院 发明人 梁慧敏;朱洪生;巫建新;鲍荣静;李晶;何任红
分类号 A01H4/00(2006.01)I;C12N5/04(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人 董建林;薛伯奇
主权项 一种沿阶草胚状体诱导及培养方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、采用沿阶草的芽基部作外植体,清洗、消毒杀菌,在无菌苗培养基上培养无菌苗;(2)、将无菌苗转接到初生胚状体培养基上诱导愈伤组织,将胚性愈伤组织继代培养,分化形成初生胚状体;(3)、将初生胚状体转接到次生胚状体培养基上诱导次生胚状体;(4)、将次生胚状体转接至成苗培养基上产生完整植株;(5)、组栽苗的移栽和成活;所述无菌苗培养基为:1/2MS+3~5mg/L GA+1~3mg/L BA+0.1mg/L IBA+蔗糖20g/L+0.7%琼脂;所述初生胚状体培养基为MS+0.1~0.5mg/L BA+0.1~0.5mg/L NAA+0.5~1mg/L 2.4D+30g/L蔗糖+0.7%琼脂;所述次生胚状体培养基为MS+2~4mg/L BA+0.2~0.5mg/L NAA+白糖30g/L+0.7%琼脂;所述成苗培养基为MS+蔗糖30g/L+0.7%琼脂;所述步骤1的培养条件温度25±1℃,光照强度为500‑10001x,光照时间为每天10‑14小时。
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