1,4-丁二胺的生物化学合成

摘要

本发明涉及一种方法，用于对1，4-丁二胺进行生物化学合成，这是在下述微生物中进行的，所述微生物具有较之鸟氨酸脱羧酶活性的天然水平来说增加的鸟氨酸脱羧酶活性(增加的ODC活性)水平，其中，增加的ODC活性是通过具有增加的翻译和/或转录效率的鸟氨酸脱羧酶编码基因的过量表达来获得的，并且其中，微生物中产生的1，4-丁二胺被排出到发酵培养液中，从发酵培养液中对其进行回收。在优选的实施方式中，增加的酶活性还通过过量表达下述基因来实现(i)精氨酸脱羧酶编码基因speA和胍基丁胺酶编码基因speB，或(ii)精氨酸脱羧酶编码基因speA和胍基丁胺亚氨水解酶编码基因aguA以及N-氨基甲酰腐胺酰胺水解酶编码基因aguB，以及可选地，还有胍基丁胺酶编码基因speB。本发明还涉及携带有增加的活性水平的上述一种或多种酶活性的载体、质粒和宿主。

主权项

对1，4‑丁二胺进行生物化学合成的方法，所述生物化学合成在下述微生物中进行的，所述微生物具有较之鸟氨酸脱羧酶活性的天然水平来说增加的鸟氨酸脱羧酶活性水平，其特征在于，较之微生物的鸟氨酸脱羧酶活性的天然水平来说所述增加的鸟氨酸脱羧酶活性水平是通过具有较之微生物的鸟氨酸脱羧酶活性的天然水平的翻译和/或转录效率而言增加的翻译和/或转录效率的鸟氨酸脱羧酶编码基因的过量表达来获得的，并且，所述微生物中产生的1，4‑丁二胺被排出到发酵培养液中，从所述发酵培养液中对所述1，4‑丁二胺进行回收，其特征在于，所述增加的翻译和/或转录效率是通过使用强的、受调控的启动子来获得的，所述强的、受调控的启动子选自异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导型强启动子构成的组，并且，其中，所述鸟氨酸脱羧酶编码基因具有核糖体结合位点，所述位点定位于所述基因的编码区域的上游，所述RBS被改造为能获得核糖体对RNA模板的更好识别。