利用pts基因和RNA干扰ads基因提高青蒿广藿香醇含量的方法

摘要

一种生物技术领域的利用pts基因和RNA干扰ads基因提高青蒿广藿香醇含量的方法，具体步骤为：获得基因ads部分序列和基因pts全部阅读框序列以及拟南芥中质体定位信号肽的tp片段；将构建成发夹结构的ads基因部分序列和质体定位的pts基因分别连于表达调控序列上，形成含adsi和质体定位的pts基因的植物表达载体；利用构建的植物表达载体转化根癌农杆菌；利用所构建的根癌农杆菌菌株转化青蒿外植体；HPLC-ELSD测定转基因青蒿中广藿香醇的含量。本发明建立了一种提高广藿香醇含量的方法，为利用转基因青蒿大规模生产广藿香醇以及除青蒿素外的其他萜类等次生代谢物奠定坚实的基础。

主权项

一种利用pts基因和RNA干扰ads基因提高青蒿广藿香醇含量的方法，其特征在于，包括步骤为：步骤一，获得青蒿素生物合成途径关键酶基因ads部分序列，广藿香醇生物合成途径关键酶基因pts全部阅读框序列和拟南芥中质体定位信号肽的tp片段；所述的ads部分序列如SEQ ID NO.1中1054bp到1427bp所示；步骤二，将获得的ads基因部分序列构建成发夹结构，然后将发夹结构和质体定位的pts基因分别连于表达调控序列上，得到含adsi和质体定位的pts基因的植物表达载体；步骤三，用含adsi和质体定位的pts基因的植物表达载体转化根癌农杆菌；步骤四，利用所构建的根癌农杆菌菌株转化青蒿外植体，PCR检测，获得转基因青蒿植株；步骤五，对获得的转基因青蒿中广藿香醇含量进行测定。