生存素与路易斯寡糖的复合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了生存素与路易斯寡糖的复合物及其制备方法和应用，该复合物由生存素与路易斯寡糖-x以非共价键结合而成，所述生存素具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；其制备方法是先制得生存素与链霉亲和素的交联物，再与(路易斯寡糖-x)-聚丙烯酸钠-生物素通过链霉亲和素与生物素的高亲和力进行结合，即制得生存素与路易斯寡糖的复合物；本发明复合物通过路易斯寡糖-x的导向作用，可成功靶向树突状细胞表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子(DC-SIGN)，促进生存素特异性T细胞免疫应答，高效诱导肿瘤细胞凋亡并抑制肿瘤血管生成，可用于制备肿瘤疫苗，在肿瘤免疫治疗领域有着良好的开发应用前景。

主权项

生存素与路易斯寡糖的复合物，其特征在于：由生存素与路易斯寡糖‑x通过链霉亲和素与生物素的高亲和力结合而成，所述生存素具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；所述复合物的制备方法包括以下步骤：a、生存素与链霉亲和素的交联物的制备：将链霉亲和素与Traut’s试剂反应制得巯基化修饰的链霉亲和素；将生存素与巯基化修饰的链霉亲和素反应制得生存素与链霉亲和素的交联物；b、生存素与路易斯寡糖的复合物的制备：在酶标板中加入(路易斯寡糖‑x)‑聚丙烯酸钠‑生物素溶液，4℃包被过夜，弃去包被液，用PBS洗涤后，再加入牛血清白蛋白溶液，4℃封闭过夜，弃去封闭液，用PBS洗涤后，再加入步骤a所得生存素与链霉亲和素的交联物溶液，37℃反应0.5～2小时，再室温反应10～60分钟，即得生存素与路易斯寡糖的复合物。