发明名称 |
一种植物中总核酸的同步提取方法 |
摘要 |
本发明属于生物技术领域,公开了一种植物中总核酸的同步提取方法。将生物材料粉碎后与CTAB裂解液混合,水浴45-60min,加入与CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂,混匀;离心,取上清,加入等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂,混匀;离心,取上清,加入1/30体积的NaAc和1/10体积的无水乙醇,混匀,在冰上静置5min后,再加入等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂;离心,取上清,加入1/10体积的NaAc和两倍体积的无水乙醇,-20℃静置1h;离心,弃上清,用70%的乙醇洗涤沉淀1~5次,干燥得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。该发明同步提取烟草总核酸,对于今后开展基因克隆、表达分析等一系列分子生物学研究具有非常重要的意义。 |
申请公布号 |
CN102115742A |
申请公布日期 |
2011.07.06 |
申请号 |
CN201010585828.X |
申请日期 |
2010.12.14 |
申请人 |
南京农业大学 |
发明人 |
章镇;张计育;乔玉山;王三红;高志红;渠慎春;陶建敏;蔡斌华;徐长宝 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
南京天华专利代理有限责任公司 32218 |
代理人 |
徐冬涛 |
主权项 |
一种植物中总核酸的同步提取方法,其特征在于将生物材料粉碎后与2%CTAB裂解液混合,65℃水浴45‑60min,加入与所述的2%CTAB裂解液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂,上下颠倒混匀;离心,取上清,加入与上清液等体积的由水饱和酚、氯仿及异戊醇组成的混合试剂,上下颠倒混匀;离心,取上清,加入1/30上清液体积的NaAc和1/10上清液体积的无水乙醇,上下颠倒混匀,在冰上静置5min后,再加入与上清液等体积的由氯仿和异戊醇组成的混合试剂;离心,取上清,加入1/10上清液体积的NaAc和两倍上清液体积的无水乙醇,‑20℃静置1h;离心,弃上清,用70%的乙醇洗涤沉淀1~5次,室温干燥,得到包含基因组DNA和总RNA的总核酸。 |
地址 |
210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号 |