从人工栽培的红豆杉枝叶中提取紫杉醇的方法

摘要

本发明是一种从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法。为了得到紫杉醇，国内外开展了种植矮壮化的红豆杉树、组织培养、半合成和全合成紫杉醇等方法获取紫杉醇原料，但组织培养法获得的产量很小，培养液价格昂贵，全合成得率很小，且疗效不及天然源紫杉醇，成本高，难以商业化应用。本发明是以人工栽培的曼地亚红豆杉、云南红豆杉、南方红豆杉或东北红豆杉的枝叶为原料，经甲醇浸泡提取、依次用石油醚和乙酸丙酯萃取，然后用常压正相硅胶柱层析法及反相高压液相色谱分离法得到99.6％以上的高纯度紫杉醇。该方法工艺简单、成本低、溶剂、洗脱剂可以回收，适合于工业化生产，且保护了植物资源。

主权项

一种从人工栽培的红豆杉枝叶中制备紫杉醇的方法，其特征在于依次包括如下步骤：A、将红豆杉枝叶粉碎后，在40～50℃下用75％～95％甲醇浸泡3次，每次4小时，将滤液浓缩后用体积比为4∶1～1∶1石油醚/水萃取；分出下层水相；B、用乙酸丙酯萃取下层水相；乙酸丙酯萃取液浓缩，得到紫杉醇含量在2％～5％紫杉醇粗提物；C、将2％以上紫杉醇粗提物同硅胶混合制备干样，填充了干样到硅胶200～300目的色谱柱上端，分别用4∶1的石油醚‑乙酸乙酯、1∶1的石油醚‑乙酸乙酯、1∶5的石油醚‑乙酸乙酯及乙酸乙酯洗脱，按段将紫杉醇含量在15％～40％之间的洗脱液馏分集中起来，经浓缩、干燥，制得中间产品；D、将步骤C所得的中间产品用体积比为30∶70的乙腈和含0.1％三氟醋酸水溶解，用高压液相色谱分离，色谱柱为C18硅胶填料，以含三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐的乙腈和含0.1％三氟醋酸水为流动相，收集洗脱液，浓缩，析出紫杉醇晶体和三氟醋酸十八烷基吡啶季铵盐固体的混合物；此混合物经离心，水洗，再离心，水洗，过滤，冷冻干燥，得到纯度为99.6％以上的紫杉醇。