改良的蛋白表达系统

摘要

公开了含有在果蝇S2细胞中具有启动子活性的核酸序列的DNA多核苷酸，其中所述的核酸序列选自(i)在每个末端具有或没有侧翼限制位点序列的SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37或SEQ ID NO：68的核苷酸序列；(ii)与(i)的任何一种序列具有至少80％序列同一性的功能核苷酸序列；(iii)为(i)或(ii)的任何一种序列的至少6个连续核苷酸的功能片段的核苷酸；(iv)与(iii)的所述功能片段具有至少80％序列同一性的功能核苷酸序列；(v)包含(i)、(ii)、(iii)和(iv)的任何一种序列的两种或更多种序列的第一嵌合核苷酸序列，和(vi)第二嵌合核苷酸序列，包含至少6个核苷酸且包含来自(iii)和/或(iv)的至少两种核苷酸序列的连续核苷酸序列段，其中每个单独的所述连续核苷酸序列段在果蝇S2细胞中不具有启动子活性。还公开了包含所述多核苷酸的载体和细胞以及利用所述多核苷酸生产感兴趣的多肽的方法。

主权项

一种分离的DNA多核苷酸，所述DNA多核苷酸适宜用于感兴趣的多肽在昆虫细胞中的异源表达，所述DNA多核苷酸包含：(a)含有至少一种选自由以下组成的组的序列的启动子DNA多核苷酸：(i)在每个末端具有或没有侧翼限制位点序列的SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37或SEQ ID NO：68的核苷酸序列；(ii)与(i)的任何一种序列具有至少80％序列同一性且在果蝇S2细胞中具有启动子活性的功能核苷酸序列；(iii)为(i)或(ii)的任何一种序列的至少6个连续核苷酸的功能片段的核苷酸，所述功能片段在果蝇S2细胞中具有启动子活性；(iv)与(iii)的所述功能片段具有至少80％序列同一性且在果蝇S2细胞中具有启动子活性的功能核苷酸序列；(v)包含(i)、(ii)、(iii)和(iv)的任何一种序列的两种或更多种序列的第一嵌合核苷酸序列，和(vi)在果蝇S2细胞中具有启动子活性的第二嵌合核苷酸序列，所述第二嵌合核苷酸序列包含至少6个核苷酸且包含来自(iii)和/或(iv)的至少两种核苷酸序列的连续核苷酸序列段，其中每个单独的所述连续核苷酸序列段在果蝇S2细胞中不具有启动子活性。