一种壳聚糖微球固定化脂肪酶制备工艺

摘要

一种壳聚糖微球固定化脂肪酶的制备工艺：(1)将假丝酵母脂肪酶溶于磷酸盐缓冲液a中，以壳聚糖微球为固定化载体，采用戊二醛交联，制备得戊二醛交联固定化的脂肪酶A；(2)在用pH值为6.5～7.5磷酸盐缓冲液b配制的0.70～0.80mg/mL假丝酵母脂肪酶溶液中，加入固定化的脂肪酶A(终浓度为0.005～0.0055g/ml)，搅拌均匀后，再加入乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐溶液，搅拌，使其充分固定，处理后得壳聚糖微球固定化脂肪酶B。利用本发明方法制备壳聚糖微球固定化酶，提高了酶蛋白的结合率和活力回收率高，固定化酶活力、比活力强，可循环使用次数达6次。

主权项

一种壳聚糖微球固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行：(1)用戊二醛为交联剂制备固定化脂肪酶A：将假丝酵母脂肪酶溶于pH值为6.5～7.5磷酸盐缓冲液a中，以壳聚糖微球为固定化载体，采用戊二醛交联，制备得戊二醛交联固定化的固定化脂肪酶A；(2)用乙基[3‑(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐活化步骤(1)制得的固定化脂肪酶A制备固定化脂肪酶B：在用pH值为6.5～7.5磷酸盐缓冲液b配制的0.70～0.80mg/mL  假丝酵母脂肪酶溶液中，加入固定化脂肪酶A，所述的固定化脂肪酶A的终浓度为0.005～0.0055g/ml，搅拌均匀后，再加入乙基[3‑(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐溶液，搅拌3～8小时，使其充分固定，用去离子水冲洗，过滤，滤饼干燥得固定化脂肪酶B，即所述的壳聚糖微球固定化脂肪酶。