粘柄丝膜菌菌剂制作方法

摘要

本发明涉及一种粘柄丝膜菌菌剂制作方法，本发明采用的工艺是粘柄丝膜菌子实体鉴别，菌种分离、纯化，菌株鉴定，菌丝体发酵液培养，菌剂制作。本发明提高樟子松苗木生长及抗性水平。同时对云杉苗木、红松苗木促生长及提高抗性水平效果显著。采用苗木截根-菌液浸根的方式，对红皮云杉2年生换床苗接种粘柄丝膜菌菌丝体发酵液，130天苗木高生长提高24％、地径生长提高29％、过氧化氢酶活性提高42％、根系活力提高11％。接种苗木无病害发生。

主权项

一种粘柄丝膜菌菌剂制作方法，其特征在于：(1)、粘柄丝膜菌子实体鉴别：子实体小至中等大，菌盖扁半球形至平展，部分中央稍突，直径4.0～9.5cm，红褐色、黄褐色，中部色稍深，粘滑，边缘平滑无条纹但有丝膜，菌褶较厚，密，初淡紫色或土黄色，后锈褐色，弯生或近直生，菌肉白色至浅黄色，菌柄圆柱形，向下渐粗，长4.8～9.0cm，粗2.5cm，污白色，下部带紫色，粘，具内菌幕残片，孢子椭圆形、扁球形，粗糙，淡锈色，(10～16)μm×(7～9)μm，(2)、菌种分离、纯化：采用组织分离法，无菌条件下，挑取菌柄与菌盖之间的组织接种于改良的马铃薯葡萄糖琼脂平板培养基上，待组织块上长出菌丝，将菌丝转接到改良的马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上，改良的马铃薯葡萄糖琼脂培养基配方，马铃薯150‑200g，葡萄糖17‑20g，琼脂17‑20g，柞树皮5‑10g，水1000ml，(3)、菌株鉴定：采用分子生物学鉴定方法，将子实体与分离得到的菌丝体分别进行rDNA ITS序列鉴定、比对，以证明分离得到的菌株来自于所分离的子实体，(4)菌丝体发酵液培养：采用改良的马铃薯葡萄糖培养基配方，马铃薯180‑250g，葡萄糖18‑20g，磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B110mg，水1000ml，接种量10％‑15％、装液量200‑300mL/500mL、摇床转速120‑140r/min、温度24℃‑26℃、发酵天数15‑20d，(5)菌剂制作：将上述发酵液无菌条件下粉碎，加入无菌水配成1发酵液：5无菌水浓度。