一种电化学乙酰胆碱酯酶生物传感器的制备方法

摘要

本发明涉及传感器技术领域，尤其涉及一种乙酰胆碱酯酶生物传感器。一种电化学乙酰胆碱酯酶生物传感器的制备方法，包括以下步骤：酶膜的制作工艺、玻碳电极的修饰工艺、酶膜的固定工艺，玻碳电极的修饰工艺采用功能化多壁碳对玻碳电极进行修饰，包括以下步骤：多壁碳纳米管的功能化、清洗、测试、修饰。由于采用上述技术方案，本发明制成的乙酰胆碱酯酶生物传感器具有结构简单、灵敏度高、能重复检测等优点。

主权项

一种电化学乙酰胆碱酯酶生物传感器的制备方法，包括以下步骤：酶膜的制作工艺、玻碳电极的修饰工艺、酶膜的固定工艺，其特征在于，所述玻碳电极的修饰工艺采用功能化多壁碳对所述玻碳电极进行修饰，包括以下步骤：1)多壁碳纳米管的功能化：称取10mg的多壁碳纳米管(MWNTs)，放入100mL的烧杯中，量取40mL浓HNO3和H2SO4混合液加入所述烧杯中混合后，超声4h、120℃离心回流3h，水洗至中性，红外炉干燥，室温下保存待用；2)清洗：所述玻碳电极修饰前，用0.3μm、30nm的Al2O3浆在麂皮上抛光至镜面，抛光后用双蒸水洗去表面污物，再移入超声水浴中清洗，每次2～3min，重复三次，最后依次用1∶1乙醇、1∶1HNO3和去离子水超声清洗，氮气环境下干燥；3)测试：清洗后，所述玻碳电极要在0.5mol/L的H2SO4溶液中用循环伏安法活化，扫描范围为‑0.6～1.0V，扫速0.1V/S，反复扫描直至达到稳定的循环伏安图为止；最后在0.20mol/L KNO3中记录1×10‑3mol/L K3Fe(CN)6溶液的循环伏安曲线，以测试所述玻碳电极的性能，扫描速度50mV/S，扫描范围为‑0.1V～0.6；当所述循环伏安曲线中的峰电位差在80mV以下，所述玻碳电极可使用，否则要重新返回步骤2)中，处理所述玻碳电极，直到符合要求；4)修饰：取2μL包含功能化的多壁碳纳米管0.12(w/v)％、壳聚糖0.48(w/v)％、戊二醛4.7(v/v)％的凝胶状混合物悬滴在清洗干净的所述玻碳电极表面，室温下干燥8h，随后用0.1mol L‑1、pH 8.0的磷酸盐缓冲液冲洗，4℃保存备用，完成所述玻碳电极的修饰。