一种泥鳅霍乱弧菌疫苗的制备方法

摘要

本发明是一种泥鳅霍乱弧菌疫苗的制备方法，其特征在于：它以泥鳅病原霍乱弧菌LD081008B-1为免疫原，以黄芪浸出液为佐剂；制备时：将霍乱弧菌LD081008B-1菌株接种在普通营养肉汤培养基上培养后加入甲醛灭活得灭活菌体；取黄芪用蒸馏水浸泡后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药1g/ml，得黄芪浸出液；将灭活菌体与黄芪浸出液混合制得疫苗。采用本发明方法制备的疫苗进行泥鳅免疫，能显著提高泥鳅抗霍乱弧菌感染的能力，增强泥鳅对病原霍乱弧菌的免疫保护力，提高泥鳅养殖的成活率，增加泥鳅养殖的产量，避免因药物残留导致的出口障碍，保证泥鳅养殖生产的健康和可持续发展，提高泥鳅养殖生产的经济效益。

主权项

一种泥鳅霍乱弧菌疫苗的制备方法，其特征在于：它以泥鳅病原霍乱弧菌LD081008B‑1(Vibrio cholerae LD081008B‑1)为免疫原，以黄芪浸出液为佐剂；其制备方法步骤如下：(1)将霍乱弧菌LD081008B‑1菌株接种在普通营养肉汤培养基上，28‑30℃培养18‑24h后，加入体积终浓度0.3％的甲醛28‑30℃灭活48h，得灭活菌体；(2)取黄芪用蒸馏水浸泡30‑60min后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药1g/mL，得黄芪浸出液；(3)将灭活菌体与黄芪浸出液混合，制得水剂型黄芪佐剂泥鳅霍乱弧菌疫苗；二者的混合比例为：每毫升黄芪浸出液中加入的灭活菌体为3.2×108cells。