具荧光素酶活性抗辐射菌的制备方法

摘要

具荧光素酶活性抗辐射菌的制备方法。以抗辐射菌Deinococcus radiopugnans由来的质粒为基础，与大肠杆菌中能自我复制的质粒进行重组而成穿梭载体。载体与具有北美产萤火虫(Photinus pyralis)的寄主DNA由来的荧光素酶基因lux领域的DNA片段重组成具有荧光素酶基因的质粒，将该质粒导入抗辐射菌属细菌，用构建的质粒转化Deinococcus grandis，得到氯霉素抗性的菌株。使用本发明制备的抗辐射菌可使用在野外开放封闭环境的各种领域，载体具有荧光素酶基因，在实时监控重组转化子的生育、分布及对环境的影响等方面有较好的使用价值。

主权项

具荧光素酶活性的抗辐射菌的制备方法，其特征在于以下步骤：(1)以SEQ ID NO：1所表示的碱基序列为基础，与大肠杆菌中能自我复制的质粒进行重组成穿梭载体，以及穿梭载体导入宿主后形成的转化子；(2)所述穿梭载体以及穿梭载体的转化子与具有北美产萤火虫Photinus pyralis的寄主DNA由来的荧光素酶基因lux片段的DNA片段重组成具有荧光素酶基因的质粒pSP‑lux+，将该质粒pSP‑lux+导入抗辐射菌Deinococcus属细菌，获得具荧光素酶活性的抗辐射菌。