沙棘的组培快繁方法

摘要

本发明涉及一种沙棘的组培快繁方法，属于植物组织培养领域。本发明的技术方案为选择饱满的沙棘种子，表面消毒后在发芽培养基上发芽；待真叶完全长出后，剪取1.5～2.0cm茎尖在含BA 0.3～0.6mg/L的WPM培养基上进行增殖培养；剪取生长健壮、长3～4cm的单苗，在含IBA0.3～0.6mg/L、NAA0.03～0.06mg/L和1.0g/LAC的1/4SH培养基上进行生根培养；当根继续长至3～6cm时，进行炼苗移栽。本方法能够诱导沙棘试管苗快速增殖产生大量的不定芽，成活率高达80％，为沙棘的大规模化育苗提供了一条有效途径。

主权项

一种沙棘的组培快繁方法，其步骤为：(1)选择饱满的沙棘种子，表面消毒后放在发芽培养基上发芽；发芽培养基包含6.5g/L琼脂粉和30g/L白砂糖；(2)待真叶完全长出后，剪取1.5～2.0cm茎尖进行增殖培养，增殖培养的基本培养基为WPM培养基：NH4NO3 400mg/L、Ca(NO3)2·4H2O 556mg/L、CaCl2·2H2O 96mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、K2SO4 990mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 17.7mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.25mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、Na2‑EDTA 37.3mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素1.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、6.5g/L琼脂粉和30g/L白砂糖；附加的植物激素为0.3～0.6mg/L的6‑苄基氨基嘌呤；(3)剪取生长健壮、长3～4cm的单苗进行生根培养，生根培养的基本培养基为1/4SH培养基：NH4H2PO4 75mg/L、KNO3 625mg/L、CaCl2·2H2O 50mg/L、MgSO4·7H2O 100mg/L、KI 1mg/L、H3BO3 5.0mg/L、MnSO4·H2O 7.6mg/L、ZnSO4·7H2O 1mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.1mg/L、CuSO4·5H2O 0.2mg/L、CoCl2·6H2O 0.1mg/L、FeSO4·7H2O15mg/L、Na2‑EDTA 20mg/L、肌醇1000mg/L、烟酸5.0mg/L、盐酸硫胺素5.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、1.0g/L活性炭、7.0g/L琼脂和15g/L白砂糖；附加的植物激素为0.3～0.6mg/L的吲哚丁酸，0.03～0.06mg/L的萘乙酸；生根培养温度为25±2℃、光照强度为1500～2000lx，光周期为18h/d；(4)当根继续长至3～6cm时，将封口膜打开，炼苗3～6天；先用镊子轻轻夹出幼苗，在流水中轻轻的洗净根部培养基，再用0.01％高锰酸钾浸泡10min，移栽至以3∶1混合的珍珠岩和蛭石为基质的营养杯中，扶正小苗，使苗根尽量舒展，保持杯内温度20～25℃、湿度80％～90％，并用玻璃培养皿盖住杯口，经过30天的炼苗后，将生根苗栽于以3∶1∶6混合的珍珠岩、蛭石和田园土为基质的花盆中生长。