表达含hCAT基因重组腺病毒载体及其重组腺病毒

摘要

本发明公开了含人过氧化氢酶基因重组腺病毒载体、重组腺病毒。是先将hCAT基因克隆到pcDNA3.1+中，酶切和基因测序鉴定阳性克隆；再利用酶切法把hCAT基因克隆至入门载体pENTR1A中。利用体外重组p ENTR1A-CAT和pAd/CMV/V5-DEST，得含人过氧化氢酶基因重组腺病毒载体。将该重组腺病毒表达载体转染包装细胞一人胚肾293A细胞得到重组腺病毒，再利用免疫印迹和240nm紫外光吸收法对重组病毒中CAT蛋白的表达量和CAT酶的活性进行了测定。本发明为研究人过氧化氢酶基因在基因治疗中的作用奠定了基础，同时为进一揭示氧化应激在一些疾病发生发展中的作用机制和对一些疾病的基因治疗的研究打下了坚实的基础。

主权项

含人过氧化氢酶(hCAT)基因重组腺病毒表达载体，其特征在于：将hCAT基因依次插入pcDNA3.1+、入门载体pENTR1A，再利用体外重组技术体外重组p ENTR1A‑CAT和pAd/CMV/V5‑DEST，得到含hCAT基因的重组腺病毒表达载体。