发明名称 检测鲜肉鲜奶食品综合毒性的方法
摘要 一种检测鲜肉鲜奶食品综合毒性的方法,属食品安全和环境保护的技术领域。在给定的条件下,发光细菌的发光强度会随外界毒物的含量而改变,检测鲜肉鲜奶食品综合毒性,包括发光细菌的准备、检测样品的准备、发光细菌的发光检测三个步骤。发光细菌是淡水发光细菌-青海弧菌Q67菌株。将鲜肉食品样品的浸出液或鲜奶食品的样品与青海弧菌Q67菌株的菌液混合均匀,通过检测的青海弧菌Q67菌株的发光强度,判定所测的鲜肉鲜奶食品的样品中所有毒物合在一起的综合毒性,给出所测的鲜肉鲜奶食品可否安全食用的结论。有快速、能检测待测样品的综合毒性、检测灵敏度高和可检测的物质的范围宽广等优点。
申请公布号 CN101071103B 申请公布日期 2011.06.01
申请号 CN200710042074.1 申请日期 2007.06.15
申请人 华东师范大学 发明人 朱文杰;徐亚同;吴淑杭;熊蔚蔚
分类号 G01N21/76(2006.01)I;G01N33/12(2006.01)I;G01N33/04(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I 主分类号 G01N21/76(2006.01)I
代理机构 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 代理人 程宗德;石昭
主权项 1.一种检测鲜肉食品综合毒性的方法,其特征在于,具体操作步骤:第1步发光细菌的准备1.1分步发光细菌菌种:采用我国独有的淡水发光细菌-青海弧菌Q67菌株,1.2分步培养基成分:MgSO<sub>4</sub> 2.47g,MgCO<sub>3</sub> 0.79g,MgBr<sub>2</sub>0.09g,MgCl<sub>2</sub> 0.109g,CaCO<sub>3</sub> 0.103g,KCl 0.122g,NaCl 8.29g,Mg(HCO<sub>3</sub>)<sub>2</sub> 0.50g,酵母膏5g,胰胨5g,甘油3g,琼脂20g,溶于1000ml蒸馏水中,制成斜面培养基,121℃下灭菌20min,贮于4℃冰箱备用,1.3分步测试用菌液的制备:将1.1分步中所述的青海弧菌Q67菌株的菌种移接到1.2分步中得到的斜面培养基上,15-25℃下培养12h-18h,此时青海弧菌Q67菌株的细菌发光明亮,用10ml生理盐水将菌苔从斜面培养基上轻柔冲刷下来,摇匀,用生理盐水调整菌液浓度,使菌液浓度OD<sub>600</sub>=0.3,得测试用菌液,取0.1ml测试用菌液,加入置有2ml生理盐水的样品测试管中,用测光仪检测青海弧菌Q67菌株的细菌的发光,发光强度在200-500万光子/秒时,测试用菌液可以使用,生理盐水是浓度为0.85%的NaCl溶液;第2步鲜肉样品的准备取鲜肉样品50g,剪切成长约5em,宽约3mm的肉丝,用50ml生理盐水浸泡15min,10000rpm的转速下离心10min,取上清液,作为样品上清液,备用,对照选用国家质量体系认证的免检鲜肉,取对照鲜肉样品50g,用上述样品处理方法同样处理,取上清液,作为对照上清液,备用;第3步发光细菌的发光检测取三个测试小杯,每杯加2ml第2步的得到的样品上清液,制成三个平行样,另取三个测试小杯,每杯加2ml第2步得到的对照上清液,制成三个平行样,以15s的时间间隔依次向各杯加0.2ml 1.3分步制得的测试用菌液,放置30min,用测光仪以15s的时间间隔依次测定各杯的发光强度,记录每杯的发光值,计算样品的三个平行样的平均发光值和对照的三个平行样的平均发光值,按下式计算相对发光强度:<img file="FSB00000031799100021.GIF" wi="1060" he="209" />根据算出的相对发光强度,查对表1,表1<img file="FSB00000031799100022.GIF" wi="1772" he="433" />得检测的鲜肉样品的综合毒性:安全、不安全或可疑。
地址 200062 上海市中山北路3663号