一种乳癖消制剂HPLC指纹图谱的构建方法

摘要

本发明涉及一种乳癖消制剂的HPLC指纹图谱的构建方法，包括供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、各原料药与成品之间的相关性的测定；用高效液相色谱仪测定，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算供试品相对保留时间和相对峰面积，即得到乳癖消制剂HPLC标准指纹图谱。并由此方法所得到的乳癖消制剂HPLC标准指纹图谱在203nm下归属于芍药的指纹图谱具有2个共有峰；归属于玄参的指纹图谱具有4个共有峰；归属于三七的指纹图谱具有6个共有峰；归属于夏枯草的指纹图谱具有1个共有峰；归属于红花的指纹图谱具有3个共有峰；归属于木香的指纹图谱具有5个共有峰；归属于连翘的指纹图谱具有2个共有峰。

主权项

一种乳癖消制剂HPLC指纹图谱的构建方法，其特征是它包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取乳癖消制剂10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声功率250W，频率33kHz处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml充分洗涤，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备：精密称取羟基红花黄色素A、芍药苷、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、连翘苷、熊果酸、去氢木香内酯适量，加甲醇使溶解，分别制成对照品溶液；各对照品浓度分别为：羟基红花黄色素A浓度为0.13mg·mL‑1，芍药苷浓度为0.125mg·mL‑1，哈巴俄苷浓度为0.12mg·mL‑1，熊果酸浓度为0.06mg·mL‑1，人参皂苷Rg1浓度为1.2mg·mL‑1，人参皂苷Rb1浓度为0.8mg·mL‑1，三七皂苷R1浓度为0.3mg·mL‑1，去氢木香内酯浓度为0.02mg·mL‑1，连翘苷浓度为0.07mg·mL‑1；(3)乳癖消制剂HPLC指纹图谱的测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各70μl，进样，用高效液相色谱仪测定，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算供试品的相对保留时间和相对峰面积，既得乳癖消制剂HPLC指纹图谱。其中所述高效液相色谱仪中的色谱柱，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈∶水，其配比为乙腈10‑95％，水90‑5％；线性梯度洗脱；时间：0‑108min；检测波长：203nm；柱温：30℃；流速：1.0ml·min‑1；其中供试品指纹图谱采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》进行评价，各检测波长下的相似度均大于0.80；其中所述乳癖消制剂HPLC指纹图谱在203nm下归属于芍药的指纹图谱具有2个特征峰；归属于玄参的指纹图谱具有4个特征峰；归属于三七的指纹图谱具有6个特征峰；归属于夏枯草的指纹图谱具有1个特征峰：归属于红花的指纹图谱具有3个特征峰；归属于木香的指纹图谱具有5个特征峰；归属于连翘的指纹图谱具有2个特征峰；所述图谱的图形如说明书附图中的图1、图2和/或图6所示的图谱。