| 发明名称 |
一种酿酒酵母中Rav2p基因克隆与表达的方法 |
| 摘要 |
一种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中Rav2p基因克隆与表达的方法，属于微生物基因工程领域。本发明设计了引物1：5’CGC<img file="201010297883.9_ab_0.GIF" wi="55" he="24" />AGTGTTGATTTGTTTCC-3’(Nde I)和引物2：5’-GA<img file="201010297883.9_ab_1.GIF" wi="63" he="26" />CTTATATGTACTTAAC-3’(Not I)，建立了酿酒酵母中Rav2p基因克隆的方法，建立了Rav2p基因原核表达载体构建的方法，建立了Rav2p在大肠杆菌中高效表达的方法。Rav2p为酿酒酵母中RAVE复合物的重要组成部分，利用本发明人构建的重组表达质粒可以实现Rav2p在酿酒酵母细胞内的基因删除，方便构建高压二氧化碳低耐受性的酵母菌株，为食品饮料行业提供新型发酵菌株。 |
| 申请公布号 |
CN102071188A |
申请公布日期 |
2011.05.25 |
| 申请号 |
CN201010297883.9 |
申请日期 |
2010.09.30 |
| 申请人 |
江南大学 |
发明人 |
张震宇;张峰;张光明 |
| 分类号 |
C12N15/10(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/39(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
| 代理机构 |
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代理人 |
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| 主权项 |
一种酿酒酵母中Rav2p的基因的克隆方法。其特征是：(1)针对酿酒酵母中RAVE复合物的中Rav2p亚基的基因，设计了引物1：5’CGCCATATGAGTGTTGATTTGTTTCC‑3’(Nde I)和引物2：5’‑GAGCGGCCGCCTTATATGTACTTAAC‑3’(Not I)；(2)直接以酿酒酵母BY4742(该菌种在国内外已广泛用于科研，且已有文献报道)菌落作为PCR反应模板。具体操作方法见实施例1。 |
| 地址 |
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学生物工程学院 |
