| 摘要 |
<p>La invención de la presente memoria descriptiva se refiere a un método mejorado para la cromatografía de intercambio catiónico de anticuerpos en el que se utiliza un paso de lavado a pH elevado para eliminar los contaminantes antes de eluir el producto de anticuerpos deseado. Este proceso tiene como resultado, entre otras cosas, una mejora en la eliminación de los contaminantes de las proteínas de ovario de hámster chino (CHOP). Según el primer aspecto, la invención proporciona un método para la purificación de un anticuerpo a partir de una composición que comprende el anticuerpo y por lo menos un contaminante, cuyo método incluye los pasos secuenciales siguientes: (a) cargar la composición en un material de intercambio catiónico, donde la composición se encuentra en un primer pH; (b) lavar el material de intercambio catiónico con una primera solución tampón a un pH mayor que el de la composición (a), donde el pH de la primera solución tampón de lavado es de alrededor de 6,8 hasta alrededor de 9,0; (e) lavar el material de intercambio catiónico con una segunda solución tampón de lavado a un pH que es menor que la solución tampón del primer lavado y (d) eluir el anticuerpo del material de intercambio catiónico con la solución tampón de elución con una conductividad que es sustancialmente mayor que aquella de la solución tampón del segundo lavado. Preferiblemente, el anticuerpo se une al CD20 humano, tal como rituximab, o se une al factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), tal como bevacizumab. Según una forma de realización preferente, la presente invención se refiere a un método para la purificación de un anticuerpo que se une a CD20 humano de una composición que comprende el anticuerpo de uno o más contaminantes seleccionados del grupo consistente de las proteínas ováricas de hámster chino (CHOP), proteína A lixiviada, ADN y anticuerpo CD20 agregado, del cual el método comprende los pasos secuenciales siguientes: (a) cargar la composición en un material de intercambio catiónico, donde la composición está a un pH desde alrededor de 4,0 hasta alrededor de 6,0; (b) lavar el material de intercambio catiónico con una solución tampón de primer lavado a un pH desde alrededor de 6,8 hasta alrededor de 9,0; ...</p> |
