多糖-蛋白轭合物疫苗

摘要

本发明公开了以高产率合成和制备多糖-蛋白轭合物疫苗的方法。该方法涉及一种反应物上的酰肼基团与其他反应物上的醛基或氰酸盐酯基的反应。所述反应以较高的轭合效率快速进行，因此可以采用简化的纯化方法从未轭合的蛋白和多糖以及其他小分子副产物中分离出所述轭合物。

主权项

制备轭合物疫苗的方法，该方法包括：将多糖与氧化剂反应，由此得到醛活化的多糖溶液；通过缓冲液更换将所述醛活化的多糖溶液的pH调至7.0到8.0；在pH为6至7，存在1‑[3‑(二甲基氨基)丙基]‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐的条件下，将蛋白与肼或己二酸二酰肼反应，由此得到酰肼活化的蛋白溶液；将所述酰肼活化的蛋白溶液的pH升高至7.0到11；通过缓冲液更换将所述酰肼活化的蛋白溶液的pH调至10.0到11.0；在pH为6至8的条件下，将所述醛活化的多糖与酰肼活化的蛋白反应，由此得到含有一或多个C＝N双键的轭合物；及将所述轭合物的C‑N双键还原成C‑N单键，由此得到能刺激免疫反应的轭合物疫苗。