海雀稗体细胞⁶⁰Cor射线辐射诱变方法

摘要

本发明涉及海雀稗体细胞60Cor射线辐射诱变方法，属于植物培养方法技术领域。以海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，60Cor射线为辐射源，剂量率为1Gy/min，辐照剂量为60Gy。颗粒状愈伤组织在附加2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L的愈伤组织继代培养基上增殖培养，用作辐射处理材料。辐射处理后的愈伤组织转到附加6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L的愈伤组织分化培养基上，绿芽分化率在76％左右。绿芽转到附加萘乙酸0.5mg/L的生根培养基上，绿芽的成苗率为42％。本发明建立的海雀稗体细胞60Cor射线辐射诱变方法适宜用于植物新品种开发，为在细胞水平上开展植物细胞辐射诱变育种提供条件。

主权项

海雀稗体细胞60Cor射线辐射诱变方法，其特征在于：1)材料选用海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，60Cor射线为辐射源；2)培养基基本培养基由MS大量元素、MS微量元素与B5维生素组成，添加蔗糖30g/L；愈伤组织继代培养基：附加2，4‑二氯苯氧乙酸2.0mg/L，6‑苄基氨基嘌呤0.05mg/L，琼脂条16g/L；愈伤组织分化培养基：添加6‑苄基氨基嘌呤2.0mg/L，琼脂条8g/L；生根培养基：附加萘乙酸0.5mg/L，琼脂条8g/L；上述各种培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.8；3)方法选择海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织在步骤2)所述愈伤组织继代培养基上进行增殖培养，用作辐射处理材料，60Cor射线的剂量率为1Gy/min，辐照剂量设置分别为60Gy、70Gy或80Gy，其中60Gy或70Gy辐照10min，80Gy辐照20min；经过辐射诱变处理的愈伤组织转移到步骤2)所述愈伤组织分化培养基上，在光照条件下培养，21d分化产生绿芽；绿芽先转移到愈伤组织分化培养基上培养25d，然后再转移到步骤2)所述生根培养基上培养，21d形成具有根、茎、叶的完整再生植株；离体培养条件：培养室温度为26±2℃，光照强度为1500lx，光照时间为16h/d。