发明名称 检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法
摘要 本发明属于分析检测技术领域,公开了一种同时分离检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法。该方法采用胶束电动毛细管色谱法对何首乌提取液进行分析检测,获得二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的电泳图谱;根据校正曲线方程计算出二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的浓度。本发明能够同时分析检测何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分,方法简单、快速和高效;所用的缓冲液主要是水溶液,无需大量使用有机溶剂,污染小,环境友好;所需的溶剂和样品量少,分析成本低。
申请公布号 CN101658559B 申请公布日期 2011.04.27
申请号 CN200910192208.7 申请日期 2009.09.09
申请人 华南理工大学 发明人 吴虹;叶秋芳;宗敏华
分类号 G01N30/02(2006.01)I;G01N30/58(2006.01)I;A61K36/704(2006.01)I;A61P1/14(2006.01)I;A61P17/00(2006.01)I;A61K125/00(2006.01)N 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人 裘晖
主权项 一种同时分离检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)将二苯乙烯苷对照品、大黄素对照品、芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品和大黄素甲醚对照品溶于甲醇中,制成上述各种对照品浓度均为50μg/mL的对照品混合液;采用胶束电动毛细管色谱法,在最佳检测条件下,对对照品混合液进行毛细管电泳分析,获得对照品混合液的电泳图谱;(2)采用胶束电动毛细管色谱法,在最佳检测条件下,对何首乌样品提取液进行毛细管电泳分析,获得样品液的电泳图谱;所述何首乌样品提取液是按以下操作步骤进行:将何首乌的干燥块根粉碎,过80~120目筛,取粉末0.2~1.0g,加入甲醇30~60mL,用甲醇超声提取15~30min,过滤,得滤液和滤渣;将滤渣用5~15mL甲醇洗涤2~4次,将洗涤液和上述滤液合并,减压蒸发除去溶剂后加入5mL甲醇溶解,摇匀,经0.22μm滤膜过滤,得到何首乌样品提取液;(3)分别根据二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的校正曲线方程,根据步骤(2)所得电泳图谱中各对应物质峰面积,计算出何首乌提取液中二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的浓度;所述最佳检测条件是:内径为75μm、有效长度为50cm的未涂层熔融石英毛细管、电泳缓冲液组成为15mmol/L硼砂‑30mmol/L十二烷基硫酸钠‑体积比10%甲醇、pH为9.6、分离电压为25kV、检测温度为25℃、进样压力为0.5psi、进样时间为10秒和检测波长为254nm。
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