受重组共基因腺相关病毒感染的骨髓单个核细胞及其应用

摘要

本发明是一种受重组共基因腺相关病毒感染的骨髓单个核细胞及其应用。受重组共基因腺相关病毒即AAV Angiopoietin1-VEGF、AAV Angiopoietin1和AAV VEGF感染的骨髓单个核细胞，其用于治疗缺血性疾病，其制备步骤包括：将影响人血管新生早期基因和晚期基因单独和合并成共基因，形成pAAV质粒系统，每个质粒各包含有一套CMV启动子和Poly A终止子系统的；将pAAV质粒系统重组于腺相关病毒中，形成三种重组共基因腺相关病毒株；将病毒株感染骨髓单个核细胞定向分化的血管内皮细胞；将感染的血管内皮细胞注射到自体缺血组织。本发明安全、高效，具有促进正常血管生成作用。

主权项

一种骨髓单个核细胞的制备方法，其特征是受重组共基因腺相关病毒即AAVAngiopoietin1‑VEGF、AAV Angiopoietin1和AAV VEGF感染的骨髓单个核细胞，其制备方法包括如下步骤：(1)将影响人血管新生早期基因即VEGF和晚期基因即Angiopoietin1，它们单独和合并，三者组合成共基因，构建在AAV质粒系统中，形成pAAV Angiopoietin1‑VEGF、pAAV Angiopoietin1和pAAV VEGF质粒，即pAAV质粒系统，其中，在第一种质粒中的VEGF和Angiopoietin1各包含有一套CMV启动子和PolyA终止子系统；(2)将pAAV质粒系统重组于腺相关病毒中，形成三种重组共基因腺相关病毒株，分别命名为AAV Angiopoietin1‑VEGF、AAV Angiopoietin1、AAV VEGF；(3)将重组共基因腺相关病毒株感染骨髓单个核细胞定向分化的血管内皮细胞。