| 摘要 |
1. Способ наращивания рекомбинантного аденовируса, включающий ! a. выращивание культуры клеток-хозяев в культуральной среде; ! b. получение рабочего банка вирусной затравки рекомбинантного аденовируса посредством инфицирования культуры клеток-хозяев, полученной на стадии а), рекомбинантным аденовирусом из мастер-банка с последующим культивированием инфицированной культуры клеток-хозяев; ! c. инфицирование культуры клеток-хозяев, выращенной, как описано на стадии a), вирусной затравкой, полученной на стадии b); !d. культивирование инфицированной культуры клеток-хозяев; ! e. сбор инфицированных клеток, полученных на стадии d); ! характеризующийся тем, что все стадии культивирования культуры клеток-хозяев осуществляют в многоуровневых культуральных матрасах HYPERFlask. ! 2. Способ по п.1, дополнительно включающий выделение и очистку вируса из собранных инфицированных клеток. ! 3. Способ по п.2, в котором очистку проводят путем центрифугирования в градиенте плотности CsCl. ! 4. Способ по п.2, в котором очистку проводят путем тангенциальной ультрафильтрации - анионообменной хроматографии. ! 5. Способ по п.1, в котором рекомбинантным аденовирусом является аденовирус, полученный на основе аденовируса серотипа 5 (Ад5). ! 6. Способ по п.1, в котором рекомбинантный аденовирус экспрессирует ген, выбранный из группы, включающей ген тимидин-киназы вируса простого герпеса 1-типа, ген р53, ген α-интерферона, ген β-интерферона, ген зеленого флюоресцентного белка (GFP). ! 7. Способ по любому из пп.5 и 6, в котором в качестве клеток-хозяев используют клетки линии НЕK293. ! 8. Способ по п.7, в котором выращивание клеток-хозяев на стадии a) включает следующие ста� |
