发明名称 利用片段互补技术重建5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶活性
摘要 本发明涉及5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)的蛋白片段,其选自EPSPS的蛋白片段对,组成所述片段对的两种片段可以连成全长EPSPS,并且这两种片段不借助任何连接结构可以通过互补而重建EPSPS活性。本发明还涉及编码所述蛋白片段的核酸分子,包含该核酸分子的表达载体和细胞。本发明还涉及利用本发明的片段或核酸分子或表达载体重建EPSPS活性的方法,以及拆分出本发明蛋白片段的方法。
申请公布号 CN1789412B 申请公布日期 2011.04.20
申请号 CN200410102289.4 申请日期 2004.12.16
申请人 北京大学 发明人 王忆平;孙义成;李燕
分类号 C12N9/00(2006.01)I;C07K14/245(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I 主分类号 C12N9/00(2006.01)I
代理机构 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人 巫肖南;封新琴
主权项 5‑烯醇式丙酮酰莽草酸‑3‑磷酸合酶(EPSPS)的蛋白片段对,其中的两条片段是组成全长EPSPS的两条片段,并且这两条片段不借助任何连接结构能通过互补而重建EPSPS活性,其中所述片段对的分割点位于EPSPS的选自下列的结构中:折叠单元之间的连接区中、α螺旋与β折叠之间的连接区中、两个β折叠之间、β折叠中、或α螺旋中,所述片段对是选自大肠杆菌EPSPS的以下片段对:N67/C68,N85/C86,N154/C155,N182/C183,N184/C185,N218/C219,N224/C225,N227/C228,N259/C260,N298/C299,N371/C372,N376/C377,N383/C384,或是选自恶臭假单胞菌CGMCC 0739EPSPS的以下片段对:N208/C209,N214/C215,N219/C220,N222/C223,N224/C225。
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