配对末端测序法

摘要

本发明描述了用于在体外反应中获得包含靶核酸的两个末端区的DNA构建体的方法的实施方案，所述方法包括以下步骤：使大核酸分子片段化产生靶核酸分子；使重组衔接子元件与靶核酸分子的每个末端连接产生衔接的靶核酸分子；使衔接的靶核酸暴露于位点特异性重组酶中，以由衔接的靶核酸产生环状核酸产物和线性核酸产物，其中环状核酸产物包含靶核酸分子；使环状核酸产物片段化产生包含得自靶核酸分子每个末端的序列区的模板核酸分子。

主权项

一种用于在体外反应中获得包含靶核酸的两个末端区的DNA构建体的方法，所述方法包括以下步骤：‑使核酸分子片段化以产生靶核酸分子；‑使重组衔接子元件与靶核酸分子的每个末端连接产生衔接的靶核酸分子；‑使衔接的靶核酸暴露于位点特异性重组酶中，由衔接的靶核酸产生环状核酸产物和线性核酸产物，其中所述环状核酸产物包含靶核酸分子；和‑使环状核酸产物片段化以产生包含来自靶核酸分子每个末端的序列区的模板核酸分子。