血清中肌酐的两步酶测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中肌酐的两步酶测定方法，属于利用可见光，通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：将试剂分为两部分，其中试剂II中仅有肌酐酰氨基水解酶有效组分，双色原物质及其它酶有效组分同在试剂I中；其测定方法为：血清先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中肌酸与试剂I反应生成醌亚胺，加入试剂II于37℃温浴4～7分钟，肌酐水解后生成肌酸，经反应生成醌亚胺。仪器在600nm～610nm波长处检测，以与试剂I反应产生的醌亚胺为空白，由试剂II反应产生的醌亚胺计算出肌酐的含量。本发明检测时不受内源性肌酸影响，其使用方法和范围与原有两步酶法相同，采用本发明完全可以通过生化分析仪器测出所需的测定结果，并且灵敏度高、精确度好，不受内外源物质的污染，便于推广应用，是一种快捷、准确性更高的肌酐检测方法。

主权项

一种血清中肌酐的两步酶测定方法，其特征在于试剂II内仅含有肌酐酰氨基水解酶及适量防腐剂；其它酶有效成分及色原物质同在试剂I中；其测定方法为：待测血清样品先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中肌酸与试剂I反应生成醌亚胺，加入试剂II于37℃温浴4～7分钟，肌酐经肌酐酰氨基水解酶水解后产生肌酸，经反应也生成醌亚胺；仪器在600nm～610nm波长处检测，以试剂I反应产生的醌亚胺为空白，从试剂II反应产生的醌亚胺计算出肌酐的含量，计算公式为：ODCr＝OD2‑OD1×[SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]肌酐浓度＝F×ODCr其中ODCR是肌酐产生的吸光度，OD1是样品加入试剂I反应后测得的吸光度，OD2是样品加入试剂II反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R1V1是试剂I的体积，R2V2是试剂II的体积，F是校正因数。