发明名称 |
定量检测肝癌缺失因子1启动子甲基化水平的方法 |
摘要 |
本发明属于基因工程和基因诊断领域,涉及肿瘤抑癌基因Deleted in Livercancer-1,肝癌缺失因子1,甲基化的检测及用途。本发明提供了一种定量检测肝癌缺失因子1启动子甲基化水平的方法:对样本DNA作甲基化修饰,再采用聚合酶链式反应扩增出肝癌缺失因子1启动子的DNA片段;加入饱和荧光染料,检测聚合酶链式反应产物的荧光变化,进行熔解曲线分析;根据样品曲线在标准曲线中的位置,确定样品中肝癌缺失因子1启动子甲基化水平。该方法具有方便、快速、不需要电泳、无污染,非常灵敏的特点,可用于各种类型的标本。可检测到低至肝癌缺失因子1启动子1%的甲基化水平。 |
申请公布号 |
CN102021234A |
申请公布日期 |
2011.04.20 |
申请号 |
CN200910196055.3 |
申请日期 |
2009.09.22 |
申请人 |
复旦大学附属华山医院 |
发明人 |
张心菊;关明;邹和建;姜昊文;陈宇明 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海正旦专利代理有限公司 31200 |
代理人 |
吴桂琴;包兆宜 |
主权项 |
一种定量检测肝癌缺失因子1启动子甲基化水平的方法,其特征在于,对样本DNA作甲基化修饰,再采用聚合酶链式反应扩增出肝癌缺失因子1启动子的DNA片段;加入饱和荧光染料,检测聚合酶链式反应产物的荧光变化,进行熔解曲线分析;根据样品曲线在标准曲线中的位置,确定样品中肝癌缺失因子1启动子甲基化水平。 |
地址 |
200031 上海市乌鲁木齐中路12号 |