发明名称 |
一种海洋黑曲霉生产耐盐纤维素酶的固体发酵方法 |
摘要 |
本发明公开了一种海洋黑曲霉生产耐盐纤维素酶的固体发酵方法。包括如下步骤:1)从东海近海10~20m深处的泥土里筛选得到一株海洋黑曲霉;2)海洋黑曲霉接种于PDA培养基上培养,得到斜面孢子,斜面孢子保藏于4℃;3)斜面孢子接种于PDA-1培养基上培养,得到活化的孢子;4)活化的孢子接种于茄子瓶斜面,42℃培养74h,得到扩培的茄子瓶斜面孢子;5)扩培得到的茄子瓶斜面孢子用灭菌的人工海水稀释到108个孢子/ml,接种于固体发酵产酶培养基,发酵8~12天,得到纤维素酶。本发明具有培养基粗狂、来源广泛和价廉等特点,生产的纤维素酶可以在较高盐含量的条件下降解纤维素,并且在高盐环境下酶异常稳定,为该水解物的后续应用打下基础。 |
申请公布号 |
CN102010856A |
申请公布日期 |
2011.04.13 |
申请号 |
CN201010242261.6 |
申请日期 |
2010.07.30 |
申请人 |
浙江大学 |
发明人 |
姚善泾;薛栋升;林东强;刘杰凤 |
分类号 |
C12N9/42(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I;C12R1/685(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/42(2006.01)I |
代理机构 |
杭州求是专利事务所有限公司 33200 |
代理人 |
张法高 |
主权项 |
一种海洋黑曲霉生产耐盐纤维素酶的固体发酵方法,其特征在于包括如下步骤:1)从东海近海10~20m深处的泥土里筛选得到一株海洋黑曲霉(Aspergillus sp),保藏于中国典型培养物保藏中心,地址为中国.武汉.武汉大学,保藏中心保藏编号为CCTCC NO:M2010132;2)海洋黑曲霉接种于PDA培养基上,40℃下培养90h,得到斜面孢子,斜面孢子保藏于4℃;3)斜面孢子接种于PDA‑1培养基,在40℃下培养90h,得到活化的孢子;4)60g茄子瓶斜面培养基装入250ml茄子瓶后压实成斜面,瓶口用8层纱布封口,得到茄子瓶斜面,活化的孢子接种于茄子瓶斜面,42℃培养74h,得到扩培的茄子瓶斜面孢子;5)400ml人工海水装入500ml容量瓶内,放入灭菌锅,在121℃,灭菌20min,得到灭菌的人工海水,扩培得到的茄子瓶斜面孢子用灭菌的人工海水稀释到108个孢子/ml,接种于固体发酵产酶培养基,在250ml锥形瓶内,接种量0.1~0.7ml、起始pH 6.0~7.0、温度42~44℃和发酵8~12天,得到纤维素酶。 |
地址 |
310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |