发明名称 |
一种生物素化蛋白质的制备方法 |
摘要 |
本发明涉及一种生物素化蛋白质的制备方法,包括以下步骤:(a)构建一种具有多功能的联合标签的蛋白表达载体,所述联合标签至少包括:便于重组蛋白纯化的标签,含有特异蛋白酶切位点的标签,以及生物素化标签;(b)把目的蛋白的编码序列克隆到步骤(a)所述的蛋白表达载体中,所述联合标签与目的蛋白进行融合表达,获得在体内或体外对融合蛋白中的生物素化标签进行生物素化的重组蛋白;以及(c)采用与联合标签相适应的特异性蛋白酶切除融合蛋白中的便于重组蛋白纯化的标签,并切断联合标签中的特异蛋白酶切位点,获得高纯度的生物素化蛋白质。本发明具有过程集成、工艺简单、生物素化效率高、蛋白结构和活性不受生物素化影响等优点。 |
申请公布号 |
CN102010875A |
申请公布日期 |
2011.04.13 |
申请号 |
CN200910192139.X |
申请日期 |
2009.09.08 |
申请人 |
广州复能基因有限公司 |
发明人 |
杨淑伟;李华平;寿建斐;林丹;黄冰 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12P21/06(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
代理机构 |
广州三环专利代理有限公司 44202 |
代理人 |
刘宇峰 |
主权项 |
一种生物素化蛋白质的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)构建一种具有多功能的联合标签的蛋白表达载体,所述联合标签至少包括:便于重组蛋白纯化的标签,含有特异蛋白酶切位点的标签,以及生物素化标签;(b)把目的蛋白的编码序列克隆到步骤(a)所述的蛋白表达载体中,所述联合标签与目的蛋白进行融合表达,获得在体内或体外对融合蛋白中的生物素化标签进行生物素化的重组蛋白;以及(c)采用与联合标签相适应的特异性蛋白酶切除融合蛋白中的便于重组蛋白纯化的标签,并切断联合标签中的特异蛋白酶切位点,获得高纯度的生物素化蛋白质。 |
地址 |
510663 广东省广州市广州科学城国际企业孵化器D区8楼 |