耐高温转醛酶及其制备方法

摘要

一种生物基因工程技术领域的耐高温转醛酶及其制备方法，其酶蛋白的核苷酸序列如SEQID No.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，该转醛酶通过根据上下游引物以海栖热袍菌的全基因组序列为模板进行扩增得到DNA片段，将该片段回收后，用NdeI和SalI内切酶进行双酶切，酶切后连接到经同样内切酶酶切的表达质粒载体pET28a上，转化大肠杆菌E.coliDH5α，筛选重组质粒并转化E.coli BL21培养至OD为0.5-0.8之间时，加入异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷并继续培养获得菌体，再加入Tris-HCl缓冲液并充分搅拌均匀后超声破碎处理，将得到的破碎液离心后取含有可溶性的含诱导表达的转醛酶蛋白的上清，经过镍柱亲和层析后可得到纯化的转醛酶蛋白。

主权项

一种嗜热耐高温的转醛酶，其特征在于，其酶蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。