固相载体化的交联酶聚集体及其制备方法

摘要

本发明公开了固定化的交联酶聚集体及其制备方法。该交联酶聚集体固定于多孔微球上，其制备方法包括：将需要固定的游离态酶分散于多孔微球中；在多孔微球内依次进行酶蛋白的沉淀、交联，最后漂洗多孔微球，即得。本发明固定化酶的方法可用于固定各种类型或来源的酶，固定化方法简便易行，容易操作，无需特殊设备，生产成本低，所制备的交联酶聚集体稳定性高，抗胰蛋白酶能力强，具有一定的物理形态和稳定结构，可回收并反复使用，在工业化生产中能用于连续性生产。

主权项

一种交联酶聚集体，其特征在于：所述交联酶聚集体固定于多孔微球载体上；其制备方法包括：首先将游离态酶溶于磷酸盐缓冲液中，配制成浓度为0.1～1.5mg/ml的酶溶液，加入多孔微球载体，在4～25℃温度条件下缓慢搅拌1～3小时，让游离态酶分散于多孔微球载体中；再依次在多孔微球载体内进行酶蛋白的沉淀、交联，最后漂洗多孔微球载体，即得；其中，所述的游离态酶选自有机磷降解酶或乳糖酶；所述多孔微球载体是聚苯乙烯型非极性吸附树脂，型号为ADS‑5，平均孔径为30nm，粒径大于100μm；所述的沉淀方法为：加入硫酸铵至饱和度为67.5％，在4℃下缓慢搅拌5小时；所述的交联方法为：加入25％的戊二醛溶液至最终浓度为2.2％，在4℃下缓慢搅拌18小时。