一种橡胶树白粉病菌离体培养方法及其培养基

摘要

本发明公开了一种橡胶树白粉病菌离体培养方法及其培养基，属于植物病理技术领域。本发明所述的橡胶树白粉病菌离体培养方法，包括步骤：A)营养液和培养盘准备：B)离体叶片准备：C)将处理后的离体叶片插入装有营养液的PCR板孔内，用在75％酒精中消毒晾干后毛笔或毛刷轻刷感病橡胶树叶片上的白粉病菌至经过营养液处理的离体叶片上，置于23℃、湿度为90％的人工气候箱中，每天进行16小时光培养，8小时暗培养。本发明所述的橡胶树白粉病菌离体培养方法简便、长期高效，能大规模培养橡胶树白粉病菌，实现了橡胶树白粉病菌在叶片上的离体培养，解决了橡胶树白粉病菌的培养和保存问题。

主权项

一种橡胶树白粉病菌离体培养方法，包括步骤：A)营养液和培养盘准备：A1、配制营养液：氯化钙100～200mg/L、6‑苄氨基嘌呤5～10mg/L、水杨酸10～80mg/L、维生素C 0.2～0.8mg/L、硫代硫酸钠0.2～0.8g/L、活性炭1～5g/L、0.2倍MS培养基大量元素(硝酸铵3.3g/L、硝酸钾3.8g/L、二水氯化钙0.88g/L、七水硫酸镁0.74g/L、磷酸二氢钾0.34g/L)；A2、在无菌培养盘中装入过40目或以下细筛的细沙，以不超过沙面的无菌水保持细沙湿润，将PCR板置于沙中，用移液枪转营养液入PCR板孔内；B)离体叶片准备：B1、选择橡胶树处于变色期的幼嫩叶片；B2、将采集的新鲜橡胶树叶片用无菌水冲洗二至三遍后，在0.3‑0.5％次氯酸钠溶液中浸泡3‑5分钟，再用无菌水冲洗二至三遍，沥干；C)将处理后的离体叶片插入装有营养液的PCR板孔内，用在75％酒精中消毒晾干后毛笔或毛刷轻刷感病橡胶树叶片上的白粉病菌至经过营养液处理的离体叶片上，置于23℃、湿度为90％的人工气候箱中，每天进行16小时光培养，8小时暗培养。