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一种提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于它是用麻疯树种子或叶片为原料提取得到的，具体步骤是：（1）、粗酶液的制备：将麻疯树种子或叶片洗净，加入pH值为7.8、浓度为0.05mol/L、内含1mmol/L EDTA的磷酸盐缓冲液，所述麻疯树种子与磷酸盐缓冲液的重量体积比为100：70～80（g/ml），匀浆，过滤，收集滤液，离心得上清液，即为粗酶液；（2）、除杂蛋白：将粗酶液于55℃水浴中热变性处理25min，于4℃下6000r/min 离心20min，去沉淀，在上清液中加入0.1 mol/L盐酸调节溶液pH 至5.0，在4℃下6000r/min 离心20min，收集上清液；（3）、硫酸铵分段盐析：在步骤（2）所得上清液中加入硫酸铵粉末，至溶液饱和度为45%，搅拌30min，静置2h，在4℃下6000r/min 离心20min，去除沉淀，于上清液中加入硫酸铵粉末至溶液饱和度为90%，搅拌30min，于4℃下静置过夜，次日取出，在4℃下6000r/min 离心40min，弃上清，将沉淀溶解于pH值为7.8、浓度为0.05mol/L、内含1mmol/L EDTA的磷酸盐缓冲液中，将溶解所得酶液装入透析袋内，于4℃透析过夜，直至酶液中无硫酸根离子检出；（4）、丙酮沉淀：向步骤（3）所得酶液中加入等体积的4℃冷丙酮，于4℃自然沉淀60min ，在4℃下6000r/min 离心40min，弃上清，用蒸馏水稀释沉淀，装入透析袋内，用pH值为7.8、浓度为0.05mol/L、内含1mmol/L EDTA的磷酸盐缓冲液透析平衡，收集酶活性部分即得超氧化物歧化酶液。 |
