一种用于基因递送的载体的制备方法

摘要

一种用于基因递送的载体及其制备方法和应用，涉及一种基因递送载体，通过两步溶胶-凝胶反应制备明胶-硅氧烷纳米杂化材料。将明胶和3-(2，3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷在酸性条件进行化合、水解反应；将该溶胶的pH值调节至弱碱性，使硅烷发生聚合反应，即可得明胶-硅氧烷纳米颗粒。所制备的明胶-硅氧烷纳米杂化材料生物相容性好，无毒副作用，稳定性高；将其与外源基因结合可实现对DNA的运输和表达，转导效率高，无免疫原性、无细胞毒性，且可转移的外源基因的大小范围可以从几十bp到几千kb，克服了病毒载体插入外源基因的大小限制。可有效地携带外源基因进入宿主细胞，并能使外源基因进行高效的转染和表达。

主权项

一种用于基因递送的载体的制备方法，其特征在于所述的用于基因递送的载体为明胶和硅氧烷组成的有机‑无机纳米杂化材料，红外光谱表征显示该纳米杂化材料在1650cm‑1、1541cm‑1、1030cm‑1、1140cm‑1和458cm‑1具有吸收，其中1650cm‑1是羰基‑C＝O的伸缩振动吸收峰，1541cm‑1是氨基‑NH2弯曲振动，1030cm‑1和1140cm‑1是Si‑O‑Si的伸缩振动，458cm‑1是Si‑O‑Si的弯曲振动；所述制备方法包括以下步骤：1)采用酸溶液作为溶剂制备明胶溶液，按质量百分比，明胶的含量为0.1％～2.5％，所述酸溶液为pH值为3的盐酸；2)按3‑(2，3‑环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷与明胶的质量比为1/2～10/1，在明胶溶液中加入3‑(2，3‑环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷，得到反应液A；3)反应液A于30～70℃加热搅拌至少10min，然后调节pH值至7～10，得到反应液B；4)将反应液B继续搅拌至整个体系呈现乳光并乳光颜色不再加深，得到乳白色悬浮液C；5)将悬浮液C离心分离，收集白色沉淀并用蒸馏水洗涤，冷冻干燥后得到明胶‑硅氧烷纳米杂化材料，即用于基因递送的载体，所述离心分离的条件为20000rpm或19000rpm，15min，30℃。