一种食用植物油中残留DNA的提取方法

摘要

一种食用植物油中残留DNA的提取方法，首先用水乳化法将油脂中的DNA逐次转移并富集至无菌水中，然后加入含有CTAB、Tris、NaCl和EDTA的提取缓冲液于63～67℃水浴中保温30～60min得到水提取液，向水提取液中加入由酚、氯仿和异丙醇混合的纯化剂进行纯化，分去有机相、水相即为纯化液，最后将沉淀剂加入预冷的纯化液中搅拌后于-25～-18℃静置至DNA沉淀析出完全后分离，经洗涤、干燥得到目标产物。本方法用实验室常用试剂即可对大豆油、玉米油、菜籽油和棉籽油中DNA实现提取，仅一次提取就可得到高纯度的模板DNA，产物纯度超过专用试剂盒，在PCR之前无需对模板进行纯化。

主权项

一种食用植物油中残留DNA的提取方法，包括油脂水乳化富集、提取、纯化、分离、洗涤和干燥，其特征在于：所述的乳化富集就是用水乳化法将油脂中的DNA逐次转移并富集至无菌水中；所述的提取就是将提取缓冲液加入富集有DNA的水中，漩涡振荡后于63～67℃水浴中保温30～60min得到水提取液，提取缓冲液为每升水中含15～25gCTAB、0.05～0.15mol Tris，1～2mol NaCl和0.01～0.03mol EDTA；所述的纯化就是将纯化剂加入水提取液中，搅拌均匀后离心分离得到水纯化液，纯化剂选自酚、氯仿和异丙醇按25：24：1的体积比混合得到的有机溶剂或/和高浓度盐水饱和的乙醚；所述的分离就是将沉淀剂加入预冷至‑8～‑12℃的水纯化液中搅拌后于‑25～‑18℃条件下静置，当DNA沉淀析出完全后分离，沉淀剂为2.5～3.5mol的NH4Ac溶液与异丙醇按1：5～6的体积比混合的沉淀剂。