摘要 |
Un proceso para la integración de ácido nucleico no marcado en el cromosoma de una célula procariota que comprende: a) introducir un casete de ADN lineal en una célula, en el que dicho casete de ADN lineal comprende: i) un gen marcador de selección; ii) dos sitios de reconocimiento de recombinasas específicas de sitio de tipo dif que flanquean a dicho gen marcador de selección; y iii) dos regiones que flanquean dichos sitios de reconocimiento de recombinasas específicas de sitio de tipo dif que son homólogas a las dos regiones que flanquean el sitio de integración en el cromosoma de de la célula; b) cultivar dicha célula en condiciones de manera que el casete de ADN lineal se integre en el cromosoma celular por recombinación homóloga; y c) cultivar dicha célula en condiciones de manera que una recombinasa endógena específica de sitio, presente en el cromosoma de la célula, actúe para escindir el gen marcador de selección por recombinación específica de sitio entre los sitios de reconocimiento de recombinasas específicas de sitio de tipo dif.
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