自动捕获内皮祖细胞促进血管化的皮肤替代物及其构建方法

摘要

本发明涉及组织工程和医学创面修复技术领域。目前传统的皮肤替代物移植后血管化速度慢、存活率低，无法在临床推广应用。本发明构建了一种能自动捕获外周血中内皮祖细胞，加速血管化的新型皮肤替代物，将低氧反应元件调控的基质细胞衍生因子9HRE-CMV基因转染到成纤维细胞，然后将表皮细胞和转基因的成纤维细胞分别种植到真皮支架两面形成夹心式皮肤替代物，移植后适时、适度地表达、分泌SDF-1α，介导外周血中EPC迁移、归巢到皮肤替代物移植部位，从而促进皮肤替代物的血管化，提高移植后存活率。本发明的皮肤替代物能明显提高对EPC细胞的趋化诱导，加速皮肤替代物的血管化，平均存活率达95％，而传统不含转基因成纤维细胞的皮肤替代物平均存活率仅为72％。

主权项

一种能自动捕获内皮祖细胞促进血管化的皮肤替代物的构建方法，该方法包括如下步骤：A)分离、培养人角朊细胞、成纤维细胞；B)构建含SDF‑1α基因表达的载体；C)构建低氧反应元件控制的SDF‑1α基因表达载体，并转染成纤维细胞；D)构建含表皮细胞‑转基因成纤维细胞的皮肤替代物。