一种快速抽提纯化RNA的试剂盒以及方法

摘要

本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及一种快速抽提纯化RNA的试剂盒及方法。本发明的试剂盒包括：裂解液、前处理液、RNA结合液、RNA洗液I和II、以及RNA过滤柱和结合柱。本发明的方法包括裂解、前处理、过滤、结合RNA、清洗提纯和洗脱等步骤。本发明摒弃了以往经典的酸性酚法及大公司的Trizol法，创造了一种全新的RNA抽提纯化方法，它使抽提纯化的时间大大缩短，只需10分钟，即可从各种材料中提纯可用于下游各种实验的高纯度RNA，如：cDNA的转录、Northern blot、RNAi等。

主权项

一种快速RNA抽提纯化试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下组分：1)样品裂解液，所述裂解液针对含多糖的材料的配方为：4.0‑6M GuCl20‑80mM MES‑NaOH，pH 5.2‑6.510‑50mM柠檬酸钠0.1‑0.6％ TritonX‑1000.5‑2％N‑月桂酰肌氨酸5‑20ul/ml β‑巯基乙醇所述裂解液针对其它材料的配方为：3.5‑5.5M GuSCN20‑80mM MES‑NaOH，pH5.2‑6.310‑50mM柠檬酸钠0.1‑0.6％ TritonX‑1000.5‑2％N‑月桂酰肌氨酸5‑20ul/ml β‑巯基乙醇；2)RNA结合柱前处理溶液，其配方为：3.5‑4.5M LiCl0.005‑0.02M HCl0.05‑0.3％ TritonX‑100；3)RNA结合溶液，其配方为；a)200‑500mM MES pH4.5‑5.5b)90‑100％乙醇，且a∶b＝1∶96；4)RNA洗液I，其配方为：50‑200mM MES‑NaOH，pH5～6，3.5‑4.5M GuSCN0.1‑1％ TritonX‑10015‑30％乙醇；5)RNA洗液II，对于植物材料所述洗液II的配方为：70‑85％乙醇0.5‑1.5％丙酮0.005‑0.05％DEPC，对于其它材料所述洗液II的配方为：70‑85％乙醇和0.005‑0.05％DEPC；6)Rnase‑free H2O；7)RNA过滤柱；以及8)RNA结合柱，所述RNA结合柱的材料为二氧化硅纤维膜。