伤寒Vi-rEPA结合疫苗中高分子结合物含量的测定方法

摘要

本发明涉及一种伤寒Vi-rEPA结合疫苗中高分子结合物含量的测定方法，该方法是将待测伤寒Vi-rEPA结合疫苗作为样1，然后再在样1中加入无水乙醇和氯化钙，然后离心去上清液而取沉淀；用盐酸溶解沉淀物并加水得到沉淀物的高分子结合物的测定样2；然后分别测定样1、样2的吸光值并利用公式计算出伤寒Vi-rEPA结合疫苗中所含的高分子结合物的含量；本发明的方法可简单、准确、快速地计算出结合疫苗中所含的高分子结合物的含量，利用该方法可评估结合疫苗的效价。

主权项

一种伤寒Vi‑rEPA结合疫苗中高分子结合物含量的测定方法，包括下述步骤：a、取待测伤寒Vi‑rEPA结合疫苗作为样1，然后按体积比(2‑3)∶1加入无水乙醇；混匀后再按与伤寒Vi‑rEPA结合疫苗的体积比的(9‑11)∶1加入氯化钙溶液，混匀后于室温放置50‑80分钟；再在6500rpm下离心20‑40分钟；将上清弃去；b、在上述步骤a中离心后的沉淀管中加入40‑60μl的盐酸溶解沉淀物，并放置20‑30分钟；然后再在沉淀管中加入与样1体积相同的水，混匀后以作沉淀物的高分子结全物的测定样2；c、用O‑乙酰基法分别测定样1、样2的吸光值A1、A2；d、根据公式(A2×2.05)/A1×100％计算出伤寒Vi‑rEPA结合疫苗中所含的高分子结合物的含量；所述的伤寒Vi‑rEPA结合疫苗是由纯化的伤寒沙门氏菌Vi多糖与基因脱毒的绿脓杆菌外毒素A共价结合而成。