一种新颖酶联-环介导等温基因扩增技术(E-LAMP)的建立与应用

摘要

本发明属于生物技术应用领域，涉及人类医学及兽医，包括RNA病毒在各种生物制品、献血员、病人血液标本等的检测。具体是应用酶联-环介导等温扩增技术(E-LAMP)，通过计算机软件分析HCV RNA病毒保守和病毒特异性基因序列，设计出六条引物完全与识别的靶序列中八个结合区匹配，只需一步就可完成在等温环境中的循环置换扩增反应，同时将普通的酶联免疫技术与RT-LAMP有机结合，通过对不同引物进行生物素标记将RT-LAMP的中产物固相到包被有链酶亲和素的微孔反应板上，再通过HRP酶标抗Digoxin抗体与标记在另一条引物上的Digoxin特异性结合而最终呈现颜色反应。实现了在单管中完成从扩增到结果呈现的全部检测过程。与传统的RT-PCR方法比较，它具有更安全、特异、灵敏、便捷的优势。

主权项

一种用于RNA病毒检测的酶联‑环介导等温扩增技术(E‑LAMP)的建立方法，其特征是将普通的酶联免疫技术与RT‑LAMP有机结合，通过对一条引物进行生物素标记，将RT‑LAMP的终产物固相到包被有链霉亲和素的酶标板或微孔反应板上，再通过辣根过氧化物酶标记抗地高辛抗体与标记在另一条引物上的地高辛特异性结合而最终呈现颜色反应。