使用单倍体交配策略在酵母中合成异聚多亚基多肽的方法

摘要

本发明提供了用于在能交配的酵母中合成和分泌重组异聚多亚基蛋白的方法。将第一种表达载体转化到第一种单倍体细胞中；并将第二种表达载体转化到第二种单倍体细胞中。鉴定各自合成不同多肽的这两种经转化单倍体细胞，然后进行遗传杂交或融合。将由此产生的二倍体菌株用于生成和分泌完整组装且有生物学功能的异聚多亚基蛋白。

主权项

用于在酵母二倍体细胞中合成包含至少两个不同亚基多肽链的分泌型异聚多亚基蛋白的方法，该方法包括：用第一种表达载体转化第一种酵母单倍体细胞，所述表达载体包含所述蛋白质的第一种亚基且其可操作连接第一种酵母启动子；用第二种表达载体转化第二种酵母单倍体细胞，所述表达载体包含所述蛋白质的第二种亚基且其可操作连接第二种酵母启动子；由所述第一种和第二种酵母单倍体细胞生成二倍体细胞；在所述第一种和第二种亚基表达且以所述多亚基蛋白的形式分泌的条件下培养所述二倍体细胞。