表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法

摘要

本发明涉及表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过在布鲁氏菌S2株菌基因组中稳定地整合进Asia I口蹄疫病毒(FMDV)江苏株VP1基因，并同时破坏了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件，使重组菌由光滑型转变为粗糙型，使菌株的安全性进一步提高，但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果，该重组菌被命名为重组布鲁氏菌rS2-JS株。该菌能够表达Asia I FMDV VP1蛋白，并诱导相应抗体产生，对Asia I FMD有良好的基础免疫作用。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状，同时实现了FMD疫苗的细胞免疫，并将为布鲁氏菌病和FMD的防控提供了一种良好的疫苗。

主权项

一种表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌，其特征在于采用非抗性筛选技术，用密码子优化的Asia I型口蹄疫病毒JS株VP1基因替代布鲁氏菌S2菌株wboA基因1‑897bp之间的序列，构建了能够表达Asia I型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌rS2‑JS株，该重组菌不仅能够良好地表达Asia I型VP1基因，而且使原始菌株由光滑型转变为了粗糙型，用该菌制备的疫苗免疫动物后，实现了对布鲁氏菌病和Asia I型FMD的双重免疫，其血清可用常规的凝集试验与自然感染相区分，本菌株已于2010年9月27日送交中国微生物保藏委员会普通微生物保藏中心，保藏号为：CGMCC No.4192。