广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明公开了一种广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法，该建立方法通过取铁皮石斛粉末，适量10％氨水润湿，85℃下在甲醇水浴回流提取4h后，过滤、蒸干，再用甲醇定容，溶液过微孔滤膜，取滤液进行色谱测定，HPLC色谱分析条件：色谱柱为Alltima C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液，梯度洗脱，流速1.2mL/min；检测波长310nm；柱温30℃，得到铁皮石斛的HPLC指纹图谱。本发明还公开了上述方法所得的标准指纹图谱，该指纹图谱有13个共有色谱峰。本发明方法精确，稳定、重现性好，所得指纹图谱可为人工合理采收铁皮石斛及为其质量控制提供科学参考。

主权项

一种广西铁皮石斛HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于该建立方法包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：精密称取过60目筛的铁皮石斛粉末1.0g于磨口三角瓶中，适量10％氨水润湿，加入甲醇50mL并密闭静置30min，于85℃下进行4h水浴回流提取，趁热过滤，滤液于65℃下旋转蒸发至干后，用5mL甲醇溶解并定容，后用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液进行色谱测定；(2)HPLC色谱分析条件：色谱柱为4.6mm×250mm 5μm的Alltima C18，以乙腈‑0.1％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长为310nm，流速为1.2mL/min，柱温为30℃；(3)测定：精确吸取供试品溶液20μL注入液相色谱仪，按步骤(2)的条件操作，记录60min的色谱图。