一种检测新城疫病毒的荧光抗体的制备方法及固相免疫荧光检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种检测新城疫病毒的荧光抗体的制备方法及固相免疫荧光检测试剂盒。用交联剂SPDP分别将R-藻红蛋白(RPE)、抗新城疫病毒(NDV)抗体衍生，衍生物以适宜摩尔比交联，经HPLC纯化制备RPE标记的抗NDV荧光抗体。荧光抗体与抗NDV抗体、琼脂糖微球、稀盐酸、洗涤液组成固相免疫荧光检测试剂盒。试剂盒的检测流程为：微球溶胀活化后用抗体包被，洗涤后与待测样品结合，洗涤后再与荧光抗体结合，充分洗涤后荧光显微镜下蓝绿光激发，观察、判定结果。本发明制备的荧光抗体得率高、纯度高、荧光呈明亮的桔黄色、稳定性好；试剂盒采用球形载体具有信号富集作用，能提高检测灵敏度。本发明适于新城疫病毒的快速检测。

主权项

一种检测新城疫病毒的荧光抗体的制备方法，包括：阴离子交换层析法纯化多管藻RPE，用摩尔比50‑100∶1的化学交联剂SPDP分别将RPE、抗新城疫病毒抗体衍生，DTT以50‑100∶1的摩尔比还原抗体衍生物产生游离‑HS，抗体‑HS与RPE衍生物以摩尔比1∶1液相交联，经HPLC纯化制备RPE标记的抗新城疫病毒荧光抗体，本发明制备的RPE标记的抗新城疫病毒荧光抗体纯度高、桔黄色荧光明亮、性质稳定，可用于新城疫病毒的快速、鉴别检测。