一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法

摘要

一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法，其包括以下步骤：(1)磁珠处理：以肽寡核苷酸修饰磁珠；(2)细胞裂解：将含有靶核酸的待分离样品加入离心管中，再加入裂解液裂解细胞；(3)核酸吸附：向溶液中加入经肽寡核苷酸修饰的磁珠，核酸被磁珠表面吸附；将离心管置于磁性分离器，磁珠吸附于试管壁；(4)去除杂质：加入水相缓冲液，对表面吸附有核酸并附着于试管壁的磁珠进行洗涤，将磁珠上的其他杂质冲洗分离；(5)核酸回收：吸附在磁珠表面的核酸直接作为PCR扩增的模板，或者加入洗脱缓冲液，使吸附在磁珠表面的核酸分子释放进入缓冲液，用于下游实验。本发明方法所用磁珠可置于4℃或-20℃保存，且运输方便，吸附效率高，价格较低。使用本发明方法提取并纯化的核酸，应用范围广泛。

主权项

一种采用磁珠从样品中提取并纯化核酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）肽‑寡核苷酸修饰磁珠：以γFe2O3和Fe3O4磁性材料合成的均一、超顺磁、单发散性多聚微球为磁性来源，每个微球体包被一层聚苯乙烯，通过乳液聚合或者分散聚合的方法制备携带羧酸盐的磁性高分子微球；经羧酸盐修饰的聚苯乙烯核心粒子表面覆被一层磁铁，oligo（dT）14再共价结合在此表面上，核酸分子能够很好的锚定在此寡核苷酸上；（2）细胞裂解：将含有靶核酸的待分离样品加入离心管中，再加入裂解液裂解细胞，以释放核酸；（3）核酸吸附：向溶液中加入肽‑寡核苷酸修饰的磁珠，核酸被磁珠表面吸附，蛋白质以及其他的杂质则不被吸附；将离心管置于磁性分离器，磁珠吸附于试管壁；（4）去除杂质：加入水相缓冲液，对表面吸附有核酸并附着于试管壁的磁珠进行洗涤，将磁珠上的杂质冲洗分离；（5）核酸回收：吸附在磁珠表面的核酸直接作为PCR扩增的模板，或者加入洗脱液，使吸附在磁珠表面的核酸分子解吸，进入洗脱液中，再用于下游实验。